（一）金耳菌种的特性

  金耳是银耳的近缘种，都有特定的伴生菌，只有在伴生菌存在的条件下，才能正常生长发育并完成生活史。但是金耳菌种获得的方法显著不同于银耳，只有采用组织分离法，才能简便地获得适用于生产的有效菌种。采用孢子弹性分离法只能获得纯粹的金耳菌丝，采用耳木分离法在绝大多数情况下都是粗毛韧革菌丝，不能单独使用，只有将金耳菌丝与其混合，才能得到较理想的生产用种，但在大多数情况下并不理想，故不适于一般生产者采用。而采用组织分离法得到的菌种，金耳菌丝和粗毛韧革菌丝均来源于同一组织块，二者自然搭配合理，并具有很强的亲合性。在这种搭配合理的菌种中，细长型的金耳菌丝占绝对优势，粗壮型粗毛韧革菌丝居于劣势，此类菌种才具有较理想的结耳能力。

  （二）培养特征

    1.金耳菌丝的培养  金耳菌丝由金耳担孢子或酵母状分生孢子萌发而来，酵母状分生孢子菌落初乳白色，后变淡褐色，在外观上很难和银耳的酵母状分生孢子菌落相区别，较干燥，很少流动性，平贴在培养基表面。酵母状分生孢子萌发时，菌落周围常出现皱纹。在木屑培养基上，当温湿度适宜时，黏稠状的分生孢子菌落，能发芽形成洁白、细弱的金耳菌丝。菌丝细而短，长度很少超过5mm，透明无色，平伏于培养基表面，极少有竖立的气生菌丝。此种菌丝移植后，极易变成酵母状分生孢子。金耳菌丝与韧革菌的菌丝生长在一起时，可形成短而密的气生菌丝，白色或淡黄色。金耳菌丝在琼脂斜面培养基上生长缓慢，仅限于接种块很小的局部范围内，用于接种原种时，必须用有白色和淡黄色菌丝团接种才能成功。有效菌种能在固体培养基的表面形成胶质的脑状金耳原基。

    2.韧革菌丝的培养  韧革菌丝在生长初期，菌丝疏松，呈绵毛状，白色，很快转变成黄色或橙黄色，后期或经多次移植色素变浅，味芳香或无味。随培养时间延长，呈厚毡状，革质而具韧性，能分泌金黄色液体。故菌龄较长的母种，很难切割。菌丝有锁状连合，在固体培养基上，很容易产生浅盘状、贝壳状或不规则形的小子实体，边缘有粗短的毡毛。

  （三）菌种分离与培养

    1.培养基菌种分离和母种培养均可采用以下培养基。

  （1）PDA培养基。

  （2）PDA+蛋白胨培养基  在PDA组分中另加蛋白胨3～5g。

  （3）PDA+麦芽煎汁培养基  在PDA组分中另加麦芽30g，取煎汁用。

  （4）玉米粉蛋白胨培养基  玉米粉100g，蛋白胨1g，琼脂20g，水1000ml。

  （5）木屑煎汁培养基  麻栎木屑500g，蛋白胨2g，蔗糖20g，维生素B1 0.5g，琼脂20g，水1000ml。

以上培养基中氮素不能加得过多，否则粗毛韧革菌丝生长旺盛，形成无效菌种。培养基pH值均为5.5～6.5，然后分装于试管或锥形烧瓶内，按常规进行高压灭菌和摆成斜面备用。

    2.分离方法

  （1）孢子分离法  选野生或段木栽培的新鲜成熟金耳子实体，经自然风干备用。分离前，用无菌水冲洗子实体，置无菌室自然风干，用手术刀将种耳切成2.5～3cm的小块，穿挂在无菌金属钓上，使耳瓣表面向下，悬挂在盛有培养基的锥形烧瓶中，塞好棉塞，于17～22℃室内培养，待耳块表面出现霜状物，培养基表面能看到薄层孢子印时，在无菌条件下，取出金属钩及种耳，塞好棉塞，移到25℃恒温箱中继续培养。42小时后培养基表面形成乳白色黏稠状的酵母状分生孢子菌落（俗称芽孢菌落）。继续培养48小时，菌落增大，相互连接成不规则的芽孢菌落，颜色变为污白色。在芽孢菌落形成时，要尽快用接种环挑取少许芽孢，在斜面进行划线接种，进行纯化培养，可得金耳酵母状分生孢子菌种（芽孢菌种）。将芽孢菌种与具亲和性的毛韧革菌丝混合培养，在形成子实体原基后作原种使用。

  （2）耳木分离法  截取一小段生长金耳的段木，切去子实体，用0.1%升汞液对段木进行表面消毒。然后用无菌操作法挑取耳基附近0.2～0.5cm的耳木组织，接种在斜面培养基上，在25℃左右培养。采用这种分离方法，通常只能得到革菌菌丝，难以分离到金耳菌丝，将其接种到木屑培养基上，经过培养，瓶内长满浓密的革菌菌丝，常分泌黄色的液体，然后在基质表面和瓶壁上形成边缘反卷，呈厚毡状、贝壳状、浅盘状或近似覆瓦状的棕红色革菌子实体。革菌也可从菌种瓶的基质中进行分离。在原种瓶的中心部位，挑取豆粒大白色菌丝块，接种到斜面上，用切割菌丝前端的方法，经2～4次纯化培养，可得到革菌的纯菌种。接种到木屑培养基上，在25℃下培养20天可满瓶，一个月后可在瓶内形成子实体。

  （3）组织分离法  野生或人工栽培的金耳子实体都可以作为分离材料，所选种耳要求大小适当，色泽正常，无病虫害，尤以幼耳为佳。金耳子实体未开瓣成团状的幼耳内部组织充实，且生活力旺盛。种耳用鲜耳或干耳均可，若用干耳分离，应放在水中浸透，取出晾干表面水分，再用75%酒精或0.1%升汞液进行表面灭菌，用手剥开或切开后，挖取金耳组织块进行分离。金耳子实体的外层黄色部分为金耳菌丝，内层浅黄色部分为毛韧革菌菌丝，其交接处往往两种菌丝相互穿插共生，分离时，应从内外层交接处挖取黄豆大小一块组织，接种到斜面培养基的中央。然后将试管置18～25℃下培养，24小时后，种块上菌丝萌发，2天后菌丝开始在斜面上生长。菌丝初期白色，渐变为淡黄色或黄棕色，多数菌丝可凭肉眼辨认到粗细长短不同的形态。4～5天后有色素分泌，7～10天菌丝在斜面长满，交织成韧性的毡状层，周围有黄白棕菌斑，即簇生的芽孢子堆。菌丝长到一定阶段，可在其表面或试管边缘形成豆粒大的黄白色、橙黄色或橙色的胶质小子实体。通常培养7～10天，当菌丝在斜面长满后，即可作母种使用。用组织分离法培养的母种含有两种菌丝，不需要再进行混合培养。

以上三种分离方法，最简便有效的是组织分离法，是目前金耳菌种分离的常用方法。

  （四）原种、栽培种制作

原种、栽培种制作同常规。

    二、培养料配制

  （一）参考配方

金耳适用阔叶树木屑、棉籽壳、玉米芯等多种原料栽培，可选用以下配方。

    1.棉籽壳78%，麦麸15%，玉米粉7%。

    2.棉籽壳72%，玉米芯20%，麦麸7%，石膏粉1%。

    3.木屑48%，棉壳30 %，麦麸10%，米糠10%，糖1%，石膏粉1%。

    4.玉米芯68%，米糠30%，石膏粉2%。

    5.阔叶树杂木屑78%、米糠或麸皮20%、白糖1%。

    6.杂木屑70%、麸皮20%、玉米粉5%、豆秆粉1%、蔗糖1%、石膏粉1%。

  （二）原料处理

玉米芯粉碎成花生粒大小，以上配方中，棉籽壳、玉米芯在配料前应进行预湿，最后调含水量为60%，pH自然。

三、装瓶（袋）、灭菌

  （一）装瓶  用500ml广口瓶装料，装料深度在压实后至瓶肩处，整平料面，用锥形木棒在培养料中间打一接种孔，孔径1.2cm，深1.5cm，用一层12cm×12cm薄膜封口，薄膜中央事先开直径2cm的孔，与培养料接种穴相对准，其上面用同样大小的牛皮纸封盖并扎紧。

  （二）装袋  选用17cm×50cm聚丙烯或聚乙烯塑料袋装料。按常规用高压或常压灭菌。冷却至30℃以下接种。

    四、接种

  （一）瓶栽  按常规无菌操作，用镊夹取栽培种瓶内一小块金耳子实体和一小块下方的菌丝块，从塑料膜孔中投入培养料的接种穴内即可。如不投入到接种穴内，则接种成功率大为降低。

  （二）袋栽  当袋料冷却至28℃左右时打孔接种。每个料袋打孔7～9个，孔的直径为1.5～2cm，深度约6.5cm，接种时孔穴底部先接入一块粗毛韧革菌丝的混合木屑菌块，然后在离穴口约1.5～2cm深处再接入一块金耳菌丝与木屑菌种块，最后在其上投放金耳耳块，耳块大小约1cm2，金耳子实体碎屑也应接入。接好种后，贴上专用封口塑料薄膜（具有一定的透气性），将接种完毕的菌棒搬入培养室（房）培养。

    五、发菌管理

  （一）瓶栽

接种后置于22～25℃培养室的地面或上架培养，保持室内空气流通，经20～25天，菌丝在瓶内长满。在菌丝满瓶后10天左右，料面产生白色间杂橙黄色菌膜，并有黄色分泌物，在接种块上很快形成脑状子实体原基。此时，为促进子实体继续分化，应将瓶口覆盖物升高2cm左右，以增加氧气供应。随着原基进一步增大，应揭去瓶口覆盖物，换上用报纸做的套筒（或用塑料袋），高约5cm，筒壁上可适当留几个通气孔，然后向纸套筒喷水保持湿润，此时室温应维持在18～24℃，温度不宜超过28℃。

  （二）袋栽

金耳属于中偏低温型类，菌丝生长速度快，呼吸作用比较强，所以在栽培管理中应密切注意温度变化和培养室的通风换气。本阶段的管理主要采取以下措施。

    1.温度调节  金耳菌丝生长的最适温度为16～20℃，温度略低于最适温度有利于金耳菌丝生长，并可适当控制粗毛韧革菌丝生长，从而可以促进金耳子实体的形成，子实体形成后，温度以18～24℃生长最好，温度过低生长缓慢。当室温10～15℃时，要做好保温工作；低于10℃，即需要加强保温或升温；高于25℃，需采取降温措施。

    2.通风换气  培养室的通风换气十分必要，一方面可以促进菌丝生长；另一方面可以有效地抑制杂菌滋生。气温较高的天气，要在早晚通风，气温较低时，可以在中午时通风。每天通风2次，每次约30分钟。

    3.湿度调节  袋内封闭培养菌丝阶段，由于封口薄膜具有既能适量透气、又能保持水分的作用，一般情况下不存在培养室湿度调节问题。为了防止杂菌生长以及培养室干净，相对湿度宜控制在80%以上。

    4.光照控制  金耳的人工栽培常接种耳块作菌种，不存在利用弱光照射诱导子实体原基发生的问题。在黑暗条件下不仅有利于菌丝生长，而且耳块也能愈合，并能正常生长发育，故需遮光培养，忌强光直射。

    5.病虫害防治  发生病虫害时，按常规方法对症下药加以处理。为保持培养室空气清洁、有效地控制杂菌滋生，培养室要进行定期消毒。

    六、出耳管理

  （一）瓶栽

当瓶内子实体长到4～5cm大小时，不要急于去掉纸套，可将纸套再次升高，使幼耳在静风、多氧、适湿（80%～85%）、适温（18～24℃）的稳定环境下分化长大。子实体已长到瓶口大小时，去掉纸套，在地面、空中每天喷水2～3次，使相对湿度达90%，并开大门窗，加强通风量和光照度，在散射光作用下加速转色（图7-2-1）。

  （二）袋栽

当金耳子实体原基发育长大到一定程度时，就要起膜、割袋、保湿，其具体措施如下。

    1.掀膜、割袋  菌种耳块定植后，随菌丝的生长，耳块表面的损伤也逐渐愈合、长大。当金耳子实体伸出孔穴时，就要掀起封口薄膜。覆盖一层干净或灭过菌的报纸保湿遮光。金耳子实体在孔内继续生长受阻时，就要进行割袋处理。割袋方法是：在接种孔口的周围，用利刀（手术刀）割去一圈塑料袋的薄膜，割圈直径4～5cm。

    2.温度调节  保持室温20～25℃。超过30℃子实体停止发育，而且还易发生烂耳；温度过低，子实体发育迟缓，幼耳萎缩，生长不良。

    3.湿度控制  出耳的管理，最关键就是湿度的调节。湿度高易长杂菌，引起感染性烂耳；湿度过低不利于子实体生长，并可引起子实体表面脱水，难以转色。出耳期，要求空气相对湿度80%～90%，可以在报纸上再盖地膜，也可以向报纸轻喷细水。晴天多喷，阴雨天少喷甚至停喷，喷水要成细雾状，忌喷重水，也不能向子实体直接喷水，水要干净，最好用冷开水。

    4.通风换气  随着子实体不断长大，要逐渐增加通风量，延长换气时间。起初每天2次，每次约40分钟；以后每日2～3次，每次1小时以上。通风换气一方面可促进金耳子实体迅速生长，另一方面能更有效地抑制杂菌生长。

    5.黄水处理  人工栽培金耳，经常出现黄水，呈水珠状黄豆粒大小，不易蒸发干燥，如不及时处理，可能引起烂耳。可用脱脂药棉或吸管吸干即可。
     6.病虫害防治  开放出耳，金耳子实体暴露于空气中。与外界环境长时间直接接触，而金耳菌丝抗力较差，容易发生病虫害与杂菌污染。故培养室要定期喷洒一定浓度的来苏尔、新洁尔灭等或甲醛蒸熏，能有效地控制杂菌污染，同时要慎防鼠害。本阶段管理要求达到：金耳子实体逐渐长大，色鲜白色，呈脑状，并有少量黄水。

    七、转色管理

从接种到转色约50天，金耳子实体基本达到生理成熟，就可以进行转色，转色应选晴天进行，方法是：揭去覆盖物，打开培养室门窗，加大通风量并给予适当光照，此时可以直接向子实体喷细雾状水以保持湿度。这样3～5日就能转为鲜橙黄色的金耳。