一、菌种配料

配方：木屑81%、麦麸15%、黄豆粉或豆饼粉2%、石膏1%、红糖1%。

先将81%锯末称好，再将15%麦麸或稻糠，2%的黄豆粉或豆饼粉，1%石膏干拌拌均，再把1%红糖溶解在5升水中，将溶解的红糖水与麦麸，黄豆粉，石膏先干拌的混合物拌均，拌均后闷堆30分钟后，再与81%锯末掺和在一起干拌拌均，拌匀后加水翻3～4遍搅拌均匀，使含水量达～65%，用测水仪的指针扎入锯末，看表盘指针读数到65即可。用土法测，手紧握料，在手指间有水珠渗出稍滴水为宜。

二、装瓶

将拌好的料闷堆1～2小时后装瓶，用黑白铁制作能坐在葡萄糖注射液瓶子上的漏斗，将拌完的料用自制的6分盘圆钩将拌完的料装入瓶中。再用1厘米的木棍从瓶口中央到瓶底打个孔。再准备一盆清水将装好的葡萄糖注射液瓶子用手以45℃的角度把瓶口放入水盆中转一圈，这样就把瓶口沾的料涮干净了，再塞好棉塞。在生产过程中当天拌好的料必须当天装瓶当天灭菌。

三、灭菌

将装好的葡萄糖注射液瓶子放在常压或高压灭菌锅里灭菌，在15千克/平方厘米的压力下保持1.5～2小时，等压力降至零时，将锅盖打开三分之一，用锅内余热将瓶口及棉塞烘干，30分钟后将葡萄糖注射液瓶子趁热取出，立即放在接种箱内。若用常压灭菌灶灭菌，保持6～8小时，将锅盖打开1/2，用锅内余热将瓶口及棉塞烘干。20分钟后将葡萄糖注射液瓶子趁热取出，灭菌一定要彻底。

四、接种

黑木耳在接菌时一定要按无菌操作进行，提高成品率，灭菌后出锅降温至30℃以下的瓶可以接种，最佳接菌温度为25～30℃之间。目前，黑木耳的接菌方法很多，可根据自已具体情况和条件定，要注意，连续接种时间不要太长，以免箱内温度过高;一个试管一级菌种接葡萄糖注射液瓶10瓶，先将试管一级菌种在无菌台式酒精灯前拔下棉塞，再将试管里的一级菌种分成10等份，把每份移接到灭菌的葡萄糖注射液瓶子里，一定注意一级菌种不能贴在瓶壁上，立即塞上棉塞缩短接种时间不给杂菌侵入的机会。

五、养菌

在黑木耳菌丝培养全过程中，要创造使菌丝体健壮生长，又能控制黑木耳的子实体正常发育的条件，其中温度是最重要的因素。培养室的第一周温度为18℃～25℃。最适温度为18～23℃之间。培养室的温度不宜超过25℃。培养室的空气相对湿度为50%～70%，湿度过高，易生杂菌。光线能诱导菌丝体扭结形成原基。为了控制培养菌丝阶段不形成子实体原基，培养室应保持黑暗或极弱的光照强度。培养室内四周撒一些生石灰，使之呈石破天惊生环境，减少霉菌繁殖的机会。瓶堆积在地面上培养菌丝时，要经常翻动。调换瓶子的位置，在检查杂菌时，一定要轻拿轻放，发现杂菌应及时取出，另放在温度较低的地方继续观察。30天基本就长好了，35天就可以接种栽培袋了。