栽培工艺流程：菌种制备→栽培季节的确定→培养料的选择→培养基配制、装瓶→灭菌→冷却→接种→培养转色管理→子座生长期一采收加工。

1.菌种制备

选用菌丝洁白、适应性强、见光后转色和出草快、性状稳定的速生高产优质菌种，是获得裁培成功和高产的关键。

与其他食（药）用菌相比，虫草菌种极易退化，因此正确的选种、保种与用种非常重要。具体做法：一是不用3代以上的母种进行扩制；二是保种时不宜用营养丰富的培养基，保种与生产要轮换使用不同配方的培养基；三是长期保藏的菌种需转管复壮后才可使用。

蟠虫草人工培养大多数用液体菌种接种，常用的液体菌种培养基1000mL配方如下：

（1）葡萄糖2%、蛋白胨0.4%、牛肉膏0.4%、磷酸二氢钾0.4%、硫酸镁0.4%、维生素B微量，pH6.5~7。

（2）玉米粉2%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母粉0.5%、硫酸镁0.05%，pH6.5~7。玉米粉加水煮沸10分钟，过滤取滤液，加入其他成分。

（3）马铃薯20%、奶粉0.5%、葡萄糖2%、磷酸二氢钾0.2%，pH6.5~7。马铃薯去皮切块后加水煮沸10~15分钟，过滤取滤液，加入其他成分。

（4）葡萄糖1%、蛋白胨1%、蚕蛹粉1%、奶粉1.2%、磷酸二氢钾0.15%、磷酸氢钠0.1%，pH6.5~7。

将配制好的培养基装入三角瓶内，一般500mL的三角瓶装量为100~200mL，塞上瓶塞，在0.1~0.15MPa（121~125℃）下灭菌20~30分钟，冷却后在无菌条件下接入母种，每支母种接6~8瓶，接种后先静置培养24小时，再置于摇床上振荡培养，播床转速为120r/min，培养温度为恒温19℃，3~5天后即可使用。优质液体菌种的标准为培养液澄清，棕色，无混浊，培养液中有大量均匀的菌丝球，有浓浓的香味。

2.栽培季节的确定

根据虫草对温度的要求，可分春、秋两季栽培。适宜的播种时间由两个条件决定，一是播种期当地句平均气温不超过22℃：二是从播种时往后推1个月为出草期，当地旬平均气温不低于15℃。春播一般安排在4月上旬播种，秋播在8月上旬播种。立秋过后，气温由高转低，昼夜温差过大，正好有利于出草，是栽培的最佳季节。

3.培养料的选择

虫草人工栽培可选用大米或小麦等作为栽培主料，大米以粗糙釉米为最佳，因其含的支链淀粉较少，灭菌后通气性较好，有利于菌丝的生长。选用的大米、小麦要求新鲜无霉变、无虫蛀。

4.培养基配制与装瓶

蛹虫草人工栽培培养基配方有多种，具体如下：

（1）籼米35g、蚕蛹粉1g、营养液45mL。

营养液组分：葡萄糖10g、蛋白胨10g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、柠檬酸铵1g、维生素B110mg，捣碎，补充水至1000mL，pH7；马铃薯200g，煮汁去渣，滤液内加入蔗糖20g、奶粉15~20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g，补充水分至1000mL，pH7~8；葡萄糖10g、蛋白胨10g、磷酸二氢钾2g、柠檬酸铵1g、硫酸镁0.5g、维生素B110mg，补充水至1000mL。

（2）籼米70%、蚕蛹粉23%、蔗糖5%、蛋白胨1.5%、酵母粉0.5%、维生素B微量。

（3）籼米89%、玉米（碎粒）10%、酵母粉0.5%、蛋白胨0.2%、K2HPO40.1%、MgSO40.05%，蚕粉、蔗糖、维生素B适量。

（4）小麦93.6%、蔗糖5%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.1%、酵母粉0.5%、蛋白胨0.3%。

（5）高梁45%、玉米渣40%、小米10%、蔗糖2%、蛋白胨2%、酵母粉0.8%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%。

用罐头瓶、塑料瓶（耐高温高压）作为栽培容器，每瓶装主料30~40g。在制作培养基时要注意以下几个方面，一是主料与营养液的比例要适当，不能太干或太湿，适宜的含水量为57%~65%；二是培养基pH严格控制在5.5~7.2之间；三是主料与营养液在灭菌前的浸泡时间不能太长，一般不能超过5小时，否则会发生培养基发酵和糖化，影响前期的转色和出草；四是培养基采用常压灭菌时必须在3小时以内使灶内温度达到100℃，否则培养基容易酸化变质，影响产量。

5.灭菌

配制好的培养基应及时彻底灭菌，采用高压蒸汽灭菌时为40～60分钟，常压蒸汽灭菌时为8~10小时。灭菌后的培养基要求上下湿度一致，米粒间有空隙，不能黏稠成糊状。

6.冷却接种

灭菌结束后取出冷却，移入接种室，当培养基冷却到30C以下时，在无菌条件下接种，每瓶接种液体菌种10mL或固体菌种10g。栽培过程中为防止杂菌感染，可适当增加接种量，以利于菌丝加快生长，迅速占领料面。接种完后即移入消毒和防虫处理的培养室内培养。

7.菌丝培养

在接种后的3周内，要进行遮光培养。接种后最初将温度保持在16C恒温培养，以减少杂菌感染，当菌丝生长至培养基1/2~2/3时，可将温度升至19℃~21℃，室内要保持黑暗、通风，空气相对湿度控制在65%左右。经15~20天菌丝可发满瓶。

8.子座培养

菌丝长满后，由白色逐渐转成橘黄色时，表明菌丝营养生长已经完成，此时菌丝已成熟，可增加光照，同时给予10C左右的温差刺激，促进转色和诱导原基形成。当培养基表面和四周有橘黄色色素出现，开始分泌黄色水珠，并伴有大小不一的圆丘状橘黄色隆起物时，则表示子座开始形成。此时室内温度保持在18℃~23℃，空气相对湿度保持在80%~90%。湿度太大则容易产生气生菌丝，对子座生长不利；湿度太低则容易使培养基失水面影响产量。在子座形成之后，应根据蟠虫草有明显趋光性的特点，结合实际情况适当调整光源方向，保证受光均匀，避免光线不均匀造成子实体扭曲或一边倒，整个培养期间要适当通风，但不可揭掉封口塑料薄膜，可在薄膜上用针穿刺小孔，以利于气体交换。

9.采收加工

一般从播种到子囊成熟需要40天左右，菌丝扭结到子座成熟需要20天左右，每瓶可生长子座5~100支，但只有5支左右商品性状最好，生物学效率在30%左右。

当子座呈橘红色或橘黄色棒状，高度达5~8cm，头部出现龟裂状花纹，表面可见黄色粉末状物时，应及时采收，若采收过迟，则子座枯萎或倒苗腐烂。采收时，用无菌弯头手术镊将子座从培养基轻摘下即可。

子座采收后，应及时将根部整理干净，晒干或于低温下烘干，然后用适量的黄酒喷雾使其回软，整理平直后扎成小捆，并包装出售。采用罐头瓶熟料裁培的方法，一瓶可出干品2~3g。

10.转潮管理

子座采收后应停水3~4天，然后将5~10mL无菌营养液注入培养基内，再扎薄膜放到适温下遮光培养，使菌丝恢复生长。待形成菌团后再进行光照等处理，使原基、子座再次发生，一般10～20天后可生长第二批子座。

11.常见问题及解决措施

1.菌丝体表面出现菌皮

菌皮形成的主要原因是转色条件控制得不好，造成转色期过长。菌皮严重影响产量和品质。措施如下：

①温度：白天控制在20℃，夜里控制在15℃，每天保持5℃温差刺激。转色阶段温度不得低于14℃，否则不能形成子座。

②光照：每天光照12小时左右，光照强度以2001x左右为宜，白天充分利用自然散射光，晚上用日光灯补光。

③湿度：培养室内空气相对湿度控制在65%。

④通风：适当通风换气，两天1次，每次30分钟。

经过上述管理，3天后菌丝开始转色，6~7天后，菌丝全部转为橘黄色。

2.接种后菌种不萌发或发菌慢

菌种不萌发或发菌慢的原因：培养基受杂菌感染，腐臭发黏；使用固体种接种，操作不熟练，造成菌种块灼伤或死种，或使用液体种接种，悬浮液中菌丝含量不足或杂菌感染所致；培养温度处于菌体正常生长温度的下限，接种块在低温下愈合慢，生长迟缓。

措施如下：①确保培养料的灭菌效果，灭菌结束，不要急于出锅，待压力表指针至零后，再冷却一段时间，以防止高温出锅料瓶内外空气交换。料瓶冷却后要及时接入菌种。将接种后培养基感染严重、已腐臭发黏的培养瓶挑出后，远离培养场地，将感染料深埋，以防杂菌扩散。②严格无菌操作，熟练运用操作技术。对确认不萌发又未感染杂菌的料瓶重新接种。③接种培养后，若环境温度偏低，培养室要辅以加温措施，保持15℃~18℃，以加快菌种定殖萌发，迅速占领料面。

3.菌丝长满料面后，向深处吃料困难

原因：灭菌前，培养料未经预湿吸水，灭菌后料内上部较干，下部为粥状；在配制培养基时，加水太多，造成灭菌后培养料黏结太紧，透气性差。

措施如下：①培养料装瓶后，不要急于装锅，可先浸泡2~3小时，待培养料上下均匀吸水后，再进锅灭菌，②重新配制培养基。

4.菌丝长势很好，但不转色，不分化子座

原因如下：①配料中氮素偏高，导致在培养过程中，菌丝徒长结被，影响转色。②培养室光线布置不匀，使处于弱光下的菌体转色淡，处于黑暗中的菌体完全不转色。③在培养室环境温度低于12℃时，菌体难以转色。④使用长期连续转管及常温下贮存时间超长的菌种，其母本变异，接种培养后，不转色，不分化子座。

措施如下：①采用科学配方，配料中严格掌握各成分的组合比例。对因配方不合理造成碳氮比失调所形成的料面结被现象，弃去表层菌被，适量补加低浓度含碳营养液，10天左右可分化子座。②调整培养室光照强度至150~200lx，使培养瓶受光均匀，不存死角。③进入生殖、生长期管理后，要及时调整室内培养温度至18℃～23℃，结合通风，促其转色。④定期对菌种进行有性繁殖，认真做好育种、选种工作。

5.菌体正常转色后，就是不出草或出草稀疏

原因如下：①栽培季节选择不当，菌体转色后，遇连续低温或高温的环境条件，使成熟的菌体转入生殖生长后，在高于或低于原基分化温度的情况下，由于基内营养的不断输送供给，而在表层形成坚硬的菌核，在周围形成爬壁菌索。②在培养室光照超强、通风较差的情况下，原基分化密集，生长缓慢相互粘连。③使用劣质菌种，种性较差。

措施如下：①根据当地的气候特点，选好栽培季节，早春低温下播种，培养室辅以加温措施，保持在15℃以上；秋季播种避开高温期，在白天气温稳定在28℃以下时播种，使培养室温度在26℃以下。对转色后不出草的菌瓶，弃去表层菌核，适量补加营养液，调整室温为15℃~21℃，待菌丝恢复生长后，拉大昼夜温差，短期内即会形成子座。②加强对培养室的通风增氧，保持培养室相对湿度80%~85%，5~6天可恢复子座的正常生长形态。③使用优质高产的适龄优质种投产。