要从可靠的单位或生产基地购入优质的一级母种，先做出草试验，经鉴定出草可靠才可用于生产。在正式生产接种前的13天-18天扩繁成二级母种，见转色正常即可供生产液体菌种使用。

    1.母种培养基制作

    A 母种培养基配方：马铃薯200-250克，葡萄糖15-20克，琼脂20克，蛋白胨5克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁1克，VB1五片，VB6一片，VB12一片，水1000毫升，PH6.8或自然。

    B 制作及灭菌：土豆煮沸25分钟过滤取滤清液，加入其它辅料微火溶化，趁热加入空白试管中，18x180的试管加8毫升，20x200的试管加10-12毫升。每7-10支试管用绳子捆扎，试管口端包扎牛皮纸或无纺布。采用手提式高压锅的，排气阀不要关闭，当烧至蒸汽从排气阀稳定冒出2-3分钟后，关闭排气阀，待压力升至0.5公斤时，打开排气阀放掉冷空气，让压力回至零，重新关闭排气阀升压至1.4公斤开始计时，灭菌30-32分钟结束。让其自然降压降温到80-90度时，轻轻地打开锅盖，移开一条缝，让锅里的余热把包扎试管的被蒸汽弄湿的牛皮纸烘干，在试管的温度差不多60度时取出，一头放在一根1.3-1.5厘米高的木条上，让其自然冷却后就成为斜面。
    添加琼脂的培养基的特性：在95度时成为液体状，低于45度时凝固成固体状。琼脂的这个特性，现在已被广泛的应用于生物培养和植物组织培养。

    2.液体菌种的培养方法

    常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。若少量生产，可以用摇瓶培养法。深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。

    液体培养基配方：

    A 土豆200克，葡萄糖10克，蛋白胨3克，磷酸二氢钾1.5克，琼脂0.5克，维生素B1 二至五片，PH值6.8或自然，水1000毫升。土豆煮沸腾后25分钟，过滤，加入其它营养辅料。

    B 免煮配方1：蛋白胨13克，葡萄糖15克，磷酸二氢钾1.5克，琼脂0.5克，维生素B1 二至五片，PH值6.8或自然，水1000毫升。

    C 免煮配方2：蛋白胨10克，酵母粉10克，玉米淀粉3克，葡萄糖10克，磷酸二氢钾1.5克，琼脂0.5克，Vb1-6片。PH6.8-7.水1000毫升。

    3.摇瓶振荡培养技术

    培养液配制好后，装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为100mL（旋转式摇床装量为350毫升），或者一个500毫升的盐水瓶装200-400毫升营养液，每瓶加入菜油5滴，起消泡作用。加棉塞后再包扎牛皮纸或无纺布封口，在1.4kg/cm2压力下灭菌30-35分钟，取出冷却到30℃以下时，无菌条件下接入3-4块约0.5厘米见方的斜面菌种，于20℃～22℃下静置培养48-72小时，见菌种块上菌丝萌发置于往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80～100次/分，振幅6cm～10cm。如果用旋转式摇床，振幅4厘米，振荡频率为120～200转／分。培养室温控制在20℃～21℃，虫草液体菌种的培养时间一般是在4天左右（食用菌在5-7天）。培养结束的标准是：培养液清澈透明，液基中悬浮着大量小菌丝球，并伴有各种菌类特有的香味。

    4.手摇培养液体菌种技术

    如果没有摇床设备，可以用手摇来解决，每天摇2-5次，每次摇1-3分钟，摇得多，菌丝也生长得快。可以把几十个瓶子放在摇篮或吊床上一起摇。

    5.接种针

    用一根直径2.5毫米的不锈钢电焊条，前三分之一磨小，头部磨尖，离针尖0.4-0.5厘米处用钢钳折弯90度就行，后面手把部分用塑料牙刷柄制作，方法是，将接种针尾端烧红，插入牙刷柄即可。

    6.灭菌注意事项

    采用压力锅灭菌母种用试管培养基和三角瓶时，必须用蒸格隔开，家用压力锅矮，试管只能斜放。盖上盖后，等蒸汽从锅中央的孔中冒出来10分钟后，盖上限压阀，待限压阀上汽后开始计时，需要35-38分钟的灭菌时间，此时，应改为小火烧，维持限压阀似起非起的状态，一定要有少量蒸汽从中间的限压阀中冒出，如没有蒸汽冒出，那就会造成灭菌温度不到位，灭菌不彻底。如果是灭菌米饭或小麦培养基，1公斤以上压力60-90分钟。

   7.批量生产栽培的灭菌 （袋栽平菇等食用菌的灭菌可进行参考。）

    装好瓶袋后，除寒冷的冬天外，一般必须立即进行上锅灭菌，将料袋堆积于灭菌平台或灶仓内，料袋行之间必须留有空隙，以利蒸汽在料袋间穿透，不造成灭菌死角，最好用周转筐。码好堆后，盖上双层塑料薄膜，再盖上无纺布保温，最外层再覆上一层塑料薄膜，灭菌堆四周仔细压上砂袋，防止蒸汽逃逸。通入蒸汽，用旺火尽快使料堆升温至100度，料堆内蒸汽饱和时，覆盖的薄膜会鼓起成气包状，刚开始时，需排掉堆内的冷空气，料堆内才会慢慢的达到100度，此后，再维持6-10小时（食用菌10-12小时），才能达到彻底灭菌的效果。此时才可以停火，焖一天，待料温下降至50-60度时出锅为最好，尽量不要在料瓶温度很高时出锅。